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免疫检查点及其配体的表达，是较早在临床上使用的伴随诊断标志物。比如，用免疫组化检测肿瘤细胞及微环境免疫细胞上PD-L1的表达，已经获批了一些临床适应症。当然PD-L1在临床上使用的价值还是有些不同的意见，甚至有一些相反的结果，比如有报道PD-L1阳性与K药治疗非小细胞肺癌临床获益相关，但是与O药治疗结果无相关性。可能与所用抗体，切片等因素都有关系（文献3）。

新的mRNA检测方法（RNA测序及RT-PCR），锆89标记的抗体药全身成像等方法用于评价PD-L1的表达与临床响应。

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肿瘤暴露在外源性致突变剂以及DNA修复复制功能缺陷的情况下，一般会产生高免疫原性的高突变负荷；而在染色体调控障碍，导致出现重复RNA，或者致癌病毒感染等引起低免疫原性的低突变负荷。

TMB产生肿瘤新生抗原，肿瘤新生抗原被机体的免疫系统识别，而肿瘤为了逃避免疫系统的攻击，上调PD-L1等免疫检查点的表达，因而PD-L1等阻断剂治疗理论上来说是很有效的。

TMB和肿瘤对于免疫检查点阻断的响应相关性，已经在非小细胞肺癌，尿路上皮癌等多种肿瘤中被广泛报道。

当然对于TMB作为伴随诊断的生物标志物也存在一些问题，如一些低肿瘤突变负荷的肿瘤（透明细胞肾细胞癌，病毒驱动肿瘤等）对于免疫检查点阻断有高的反应性。可能TMB分类和新生抗原免疫原性，样本取样位置等技术因素的克服，总TMB的计算等，需要进一步深入研究。

TMB产生（文献8）

由基因突变或表观遗传改变产生MMR基因缺陷(MMRD)，在一系列肿瘤可见，尤其是结直肠癌和子宫内膜癌。

检测方法包括：免疫组化检测MMR蛋白质，PCR和NGS检测MMR和MSI（微卫星不稳定）。检测可能出现假阴性和假阳性问题。

病毒感染

比如人乳头瘤病毒（HPV）已经被用于HPV阳性宫颈癌，头颈部鳞癌等ICB治疗疗效评价。

其他

突变产生的新生抗原，肿瘤表观遗传学改变等均与肿瘤耐药相关

免疫微环境中的免疫细胞和炎症细胞群体性质和功能，是ICB反应的关键预测因子。发炎的肿瘤微环境，相对丰富的CD8+细胞毒性T细胞，相对缺乏CD4+调节性T细胞，激活干扰素介导的信号，是ICB治疗反应所需要的。

KEYNOTE-086研究中，病理学家使用HE染色评价切片中TILs，发现其数量和K药的响应呈正相关。

KEYNOTE-173研究中，三阴性乳腺癌，使用K药新辅助治疗加化疗，活检TILs增加和ORR，CR增加相关。

临床上，有科学家根据TILs和PD-L1的表达，将肿瘤分为四类：T1（PD-L1和TILs双阴），T2（PD-L1和TILs双阳），T3（PD-L1阴性和TILs阳性），T4（PD-L1阳性和TILs阴性）。T2理论上ICB治疗，响应最好，T1的ICB治疗，响应最差。T4可以通过DC疫苗，或者溶瘤病毒增加TILs的浸润，可以提高治疗效果。

现在开发了多种方法进行TILs的分析：自动成像，流式细胞术，单细胞测序，多色荧光等。

T相关细胞炎性基因

Keynote-028研究，18-Genes的T细胞炎性基因panel被使用，K药治疗响应的患者比不响应的患者，表达水平高（文献5）。

T细胞炎症因子谱与ICB治疗（文献5）

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宿主标志物

微生物组

肠道中的微生物组影响机体免疫，与ICB治疗以及治疗相关副作用都相关。双歧杆菌，柯林斯氏菌，肠球菌，Akkermansia菌等被证实在ICB治疗响应者体内富集（文献6）。

微生物组影响ICB治疗（文献6）

宿主机体免疫状态

循环免疫细胞和炎症细胞的特征与ICB的反应有关。中性粒细胞/淋巴细胞比率升高，乳酸脱氢酶升高，与ICB的响应差相关。而嗜酸性粒细胞计数升高，则与高的反应性相关。黑色素瘤CD14+CD16−HLA-DRhi单核细胞增高，和ICB治疗响应增高相关。

生殖系多态性

宿主HLA-I基因多态性已被证明会影响ICB的反应。HLA-I多态性影响抗原呈递，T细胞扩增，生存等（文献7）。